Como fazer OGM's - rDNA

Para obtermos os ditos organismos geneticamente modificados, os geneticistas recorrem a alguns processos. De seguida apresentaremos alguns, explicados da forma mais simplificada que conseguimos.

ADN Recombinante ou rDNA

O ADN recombinante é o nome de uma técnica laboratorial que permite obter uma molécula de ADN artificial que resulta da combinação de diferentes segmentos de ADN.




• Selecciona-se a parte do ADN de um determinado organismo que codifica o gene desejado;
• Selecciona-se a parte do ADN do plasmídeo da bactéria que corresponde àquele gene;
• Escolhe-se a enzima de restrição que irá “cortar” o ADN nas partes desejadas, tanto para o plasmídeo da bactéria como para o do outro organismo;
• Temos agora o plasmídeo da bactéria com um “buraquinho” para inserir lá a porção de ADN que codifica o gene desejado;
• Obtêm-se assim o novo plasmídeo (que se formou também com a ajuda das ADN ligases) que será inserido na bactéria;
• Coloca-se a bactéria e o novo plasmídeo num recipiente onde se vai aplicar uma descarga eléctrica (usando um electroporador);
• Obtêm-se a bactéria com um plasmídeo geneticamente modificado.

Agora vamos a algumas definições:

Plasmídeo: forma de ADN, também circular, que partilha o espaço celular com a molecula principal. Também contém informação genética e é responsável por exemplo, por dar às bactérias resistência contra os antibióticos.



Célula procariótica: Células muito simples, com poucos organelos e cujo seu material genético se encontra disperso na célula. As células de uma bactéria, por exemplo, são procarióticas, sendo a bactéria um ser procarionte.




Célula eucariótica: Células mais complexas, com mais organelos e cujo seu material genético se encontra organizado num núcleo. Existem células eucarióticas animais e vegetais. As células do ser humano são, por exemplo, eucarióticas animais, por isso o ser humano é eucarionte.

Electroporador: Instrumento utilizado em laboratório para situações como esta por exemplo. Aplica uma descarga eléctrica ao pretendido, neste caso na bactéria, destabilizando a sua parede celular e abrindo deste modo poros que permitem a entrada de matéria, neste caso do plasmídeo.

Enzima de restrição: Enzima libertada por bactérias por exemplo, que “cortam” o ADN em certas partes, devido à sequência das bases azotadas. Por exemplo, a enzima de restrição EcoRI (da bactéria E. coli) vai cortar o ADN quando este apresentar a sequência

↓
5'-GAATTC-3'
3'-CTTAAG-5'
↑

(ou seja, começa a cortar quando “vir” uma guanina (G) na cadeia 5’-3’ do AND e acaba de cortar quando chegar a uma guanina na cadeia 3’-5’ do ADN).

ADN ligase: Enzima que vai unir as pontas soltas do plasmídeo às do segmento de ADN de interesse.